Przeniesienie genu antybiotyku peptydowego katelicydyny przywraca zabijanie bakterii w modelu heteroprzeszczepu mukowiscydozy 3

Infekcja różnych typów komórek hodowlanych (293, HeLa, Calu-3, komórki nabłonkowe dróg oddechowych w hodowli transwalusowej) za pomocą H5.020.CMVLL-37 ujawniła obecność LL-37 w supernatancie większości transdukowanych komórek. W żadnym wypadku nie mogliśmy wykryć żadnej aktywności przeciwdrobnoustrojowej ani żadnego innego produktu wydzielniczego po zakażeniu H5.020.CMVPG3. Dlatego H5.020.CMVPG3 został użyty jako wektor kontrolny w niniejszym badaniu. Ludzkie heteroprzeszczepy oskrzelowe. Ludzkie heteroprzeszczepy oskrzeli przygotowano jak opisano wcześniej, stosując komórki od zdrowych osób i pacjentów z CF (5, 9, 12). W skrócie, pierwotne komórki oddechowe usunięte z ludzkiego oskrzela przez trawienie proteazą 14 (Sigma Chemical Co., St. Louis, Missouri, USA) i utrzymywane w hodowli przez pięć do siedmiu dni zostały zaszczepione (2 x 106 komórek na szczep) w 30 .l hormonalnie zdefiniowanej pożywki wzrostowej (Clonetics, BioWhittaker Inc. Walkersville, Maryland, USA) w tchawicach uzyskanych od zamarłych CO2 szczurów Fisher 344, z których nabłonek został pozbawiony trzech rund zamrażającego rozmrażania. Te tchawice zligowano z plastikowymi rurkami, wszczepiono podskórnie w bokach nu / nu myszy BALB / c i utrzymywano przez trzy tygodnie, aby umożliwić dojrzewanie w pełni zróżnicowanego nabłonka. W celu zakażenia zróżnicowanych heteroprzeszczepów 5 x 109 cząstek wirusa (H5.020.CMVLL-37, H5.020.CMVPG3 lub H5.020.CBCFTR) zawieszono w 50 ul PBS i wprowadzono do układu rurki ksenoprzeszczepy normalne i CF. Po 12 godzinach inkubacji heteroprzeszczepy przepłukano sterylnym PBS. Począwszy od pięciu dni po zastosowaniu wirusa, ASF wytwarzany przez heteroprzeszczepy był zbierany i analizowany pod względem aktywności przeciwdrobnoustrojowej i obecności LL-37 / hCAP-18. Charakterystyka ASF. ASF odzyskano z heteroprzeszczepów i wyekstrahowano i liofilizowano jak opisano (5, 9, 12). Wykazano, że takie leczenie zwiększa odzyskiwanie kationowych substancji przeciwdrobnoustrojowych, takich jak peptydy przeciwdrobnoustrojowe, lizozym i laktoferyna, oraz w celu poprawy czułości testu przeciwdrobnoustrojowego. Po odtworzeniu do początkowej objętości i nastawieniu pH na obojętny, określono aktywność przeciwdrobnoustrojową płynu przeciw Pseudomonas aeruginosa PAO1 i Staphylococcus aureus ATCC 29213. Bakterie hodowano jak opisano (5, 9). Łącznie 200 CFU bakterii w 5 .l inokulowano do 30 .l ASF i inkubowano przez dwie godziny. Po rozcieńczeniu objętości do 200 ul pożywką (NB), jedną czwartą wysiano na płytki z agarem NB i kolonie zliczono po całonocnej inkubacji. Każdy eksperyment powtórzono co najmniej trzykrotnie, stosując od 10 do 30 pojedynczych heteroprzeszczepów dla jednej grupy eksperymentalnej. Liczbę zaszczepionych CFU określano przez seryjne wysiewanie na płytki agarowe NB
[hasła pokrewne: leczenie lekomanii, centrum rehabilitacji kraków, encyklopedia zdrowia ]

Tags: , ,

No Responses to “Przeniesienie genu antybiotyku peptydowego katelicydyny przywraca zabijanie bakterii w modelu heteroprzeszczepu mukowiscydozy 3”

  1. Lord Nikon says:

    Ciekawe kto finansuje takie projekty ?

  2. Dancing Madman says:

    [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: krzesło do masażu[...]

  3. Night Train says:

    Prawie wszystkie owoce mają witaminę C, minerały, barwniki

Powiązane tematy z artykułem: centrum rehabilitacji kraków encyklopedia zdrowia leczenie lekomanii