Monoklonalne przeciwciało stymulujące tarczycę 3

Przeciwciała monoklonalne MS-1 i TAb-8 wykazały większą niż 80% konkurencyjność w przypadku wiązania TSH znakowanego 125I, ale nie zaobserwowano żadnej konkurencji z pozostałymi trzema przeciwciałami monoklonalnymi (tabela 2). W teście biologicznym cAMP, MS-1 indukował około 13-krotnie większą produkcję cAMP w komórkach CHO-hTSHR (27. 16 vs. 346. 0,0 fmol) i siedem razy więcej w komórkach CHO-mTSHR (12. 3,2 vs. 84,3. 19,2 fmol). ) niż w świeżej pożywce. Nie obserwowano zwiększenia wytwarzania cAMP w kontrolnych komórkach CHO (z 17,6. 2,6 do 12,2. 0,4 fmol z 2,5. G / ml MS-1). W obecności 100 (j / ml TSH, MS-1 i TAb-8 blokowały wytwarzanie cAMP indukowane przez TSH. Tak więc, MS-1 był monoklonalnym TSHR-Ab, który rywalizował o wiązanie TSH i indukowaną stymulację tarczycy. MS-1 był również w stanie zająć TSHR i zablokować dalszą aktywność TSH. W przeciwieństwie do tego TAb-8 rywalizował o wiązanie TSH i wykazywał aktywność blokowania TSH, ale nie wykazywał aktywności stymulującej tarczycę. TAb-4 wykazywał jedynie aktywność blokującą TSH, podczas gdy TAb-6 i TAb-16 były neutralnymi przeciwciałami TSHR. Do tej pory MS-1 był w hodowli w naszym laboratorium przez 3 miesiące i został przeklasyfikowany trzykrotnie i zachował swoją stabilność. MS-1 był dalej badany w celu określenia siły działania pobudzającego i blokującego tarczycę. Jak pokazano na fig. 1, obserwowano wytwarzanie cAMP ponad dwa razy wyższe niż podstawowy poziom cAMP przy stężeniach MS-1 do około 20 ng / ml. Interesujące jest to, że aktywność ta miała pik około 5 .g / ml, a przy wyższym stężeniu (10 .g / ml) aktywność stymulująca tarczycę była znacząco zmniejszona (P <0,005). Aktywność TSH-blokująca MS-1, wtórna do zajętości TSHR, była dalej oceniana w badaniu seryjnego rozcieńczenia (Figura 2). Ponieważ MS-1 jest monoklonalnym przeciwciałem stymulującym TSHR, cAMP wytworzony przy stymulacji 100 (j / ml TSH był sumą cAMP wytwarzanego przez TSH i MS-1. Jak pokazano na Figurze 2, przy jednoczesnej stymulacji przez TSH, MS-1 zahamowało zwiększone wytwarzanie cAMP indukowane przez dodanie TSH. Ta interferencja ze stymulacją TSH była widoczna do około 500 ng / ml. Figura Badanie reakcji na dawkę cAMP monoklonalnego przeciwciała stymulującego TSHR MS-1. MS-1 badano pod kątem aktywności stymulującej tarczycę we wskazanych stężeniach. TAb-4 i TAb-8 (5 .g / ml) zastosowano jako kontrole negatywne. Stymulację tarczycy wyrażono jako stosunek do podstawowych poziomów cAMP indukowanych przez pożywkę hodowlaną. Ponad 200% stymulacji powyżej linii podstawowej zostało ocenione jako pozytywne i jest przedstawione jako linia przerywana. Figura 2Dozależne badanie aktywności blokującej MS-1. Komórki CHO-hTSHR stymulowano MS-1 we wskazanych stężeniach z lub bez 100 (j / ml TSH. Ponieważ MS-1 jest monoklonalnym przeciwciałem stymulującym TSHR, cAMP wytworzony przez sam MS-1 odjęto od cAMP wytworzonego przez MS-1 plus TSH. Samo medium wytwarzało mniej niż 50 fmol / studzienkę cAMP, a TSH (100 (j / ml) generowało 2000 fmol / studzienkę. Wyznaczanie epitopów przeciwciał monoklonalnych. W liniowym teście epitopowym z użyciem ludzkich peptydów TSHR nie określono głównych epitopów tych przeciwciał monoklonalnych. Jednakże zaobserwowano niski stopień immunoreaktywności obserwowany dla peptydów odpowiadających resztom 316. 335 z TAb-4 i TAb-6 i resztom 301. 320 z TAb-16 (Tabela 2). Ponieważ pięć monoklonalnych przeciwciał TSHR-Ab wybrano przez rozpoznanie TSHR eksprymowanej na komórkach CHO-hTSHR w jej natywnej konformacji, nie było nieoczekiwane, że nie mieliby znaczącego rozpoznania peptydów TSHR. Przeciwciała były również dalej testowane ze stałymi komórkami CHO-hTSHR, na których oczekuje się, że antygen TSHR utraci swoją natywną konformację. Jak pokazano na Figurze 3, silne zabarwienie CHO-hTSHR przez MS-1 (Figura 3a) utracono po utrwaleniu (Figura 3b), potwierdzając, że MS-1 rozpoznawał epitop konformacyjny TSHR [patrz też: nfz przegladarka skierowan do sanatorium, ksobne, jak zrobić chłopakowi dobrze ustami ]

Tags: , ,

No Responses to “Monoklonalne przeciwciało stymulujące tarczycę 3”

  1. Nessie says:

    [..] Artukul zawiera odniesienia do tresci: granulator tworzyw sztucznych[...]

  2. Jokers Grin says:

    Widzę lekką poprawę

  3. Teodor says:

    [..] Oznaczono ponizsze tresci z artykulu oryginalnego: badania psychotechniczne[...]

  4. Remigiusz says:

    O zastrzykach nawet nie myślę

Powiązane tematy z artykułem: jak zrobić chłopakowi dobrze ustami ksobne nfz przegladarka skierowan do sanatorium