Monoklonalne przeciwciało stymulujące tarczycę 1

Używając tych przeciwciał, byliśmy w stanie oszacować rozszczepienie TSHR za pomocą cytometrii przepływowej. Jak pokazano na Fig. 5 i Fig. 6, TSH znacząco zmniejszało wiązanie przeciwciała monoklonalnego RSR-4 (Figura 6a), podczas gdy nie obserwowano znaczącego zmniejszenia z przeciwciałem przeciwko regionowi nierozszczepiającemu (Figura 6b). To obniżenie immunoreaktywności RSR-4 obserwowano we wszystkich testowanych stężeniach TSH i wydawało się, że TSH wzmacnia rozszczepienie TSHR w zależności od dawki (Figura 5) i sposób zależny od czasu wykrywalny w ciągu 3 godzin ekspozycji (dane nie pokazane). Doszło do 75% hamowania początkowego wiązania RSR-4 po leczeniu 1000 jm / ml TSH (Figura 5). Gdy MS-1 badano pod kątem wzmocnienia cięcia TSHR, nie zaobserwowano żadnego (fig. 6, c i d). Tak więc cięcie TSHR było szczególnie przyspieszone przez TSH, ale nie przez stymulowanie TSHR-Ab. Figura 5 Rozszczepienie 5TSHR. Komórki CHO-hTSHR traktowano wzrastającymi stężeniami TSH przez 24 godziny i barwiono dwoma monoklonalnymi przeciwciałami TSHR-Ab w celu zbadania wpływu TSH na rozszczepienie TSHR. RSR-1 (białe paski) rozpoznało. podjednostka TSHR, w przeciwieństwie do rozpoznania regionu poddanego rozszczepieniu receptora (reszty 317. 366) przez RSR-4 (czarne słupki). Należy zauważyć, że RSR-4 nie miał aktywności konkurującej z TSH. Zmniejszenie immunoreaktywności za pomocą RSR-4 było miarą rozszczepienia TSHR i obserwowano po leczeniu TSH (ponad 10 (U / ml). Figura 6TSHRCT nie jest indukowana przez MS-1. Komórki CHO-hTSHR traktowano 100 (j / ml TSH przez 24 godziny i wybarwiono dwoma monoklonalnymi przeciwciałami TSHR-Ab i wykazano zmniejszenie immunoreaktywności RSR-4 (a), ale nie RSR-1 (b) . Przeciwnie, podobne traktowanie za pomocą MS-1 (5 .g / ml) nie zmieniło immunoreaktywności ani przez RSR-4 (c) ani RSR-1 (d), co wskazuje, że MS-1 nie przyspieszało cięcia TSHR. Cienkie linie wskazują zabarwienie komórek CHO-hTSHR bez TSH (aib) lub MS-1 (cid), a grube linie wskazują komórki CHO-hTSHR z TSH (a i b) i MS-1 (cid ), odpowiednio. Dyskusja Poniżej opisujemy udane klonowanie monoklonalnego przeciwciała TSHR (MS-1) o silnej aktywności stymulującej tarczycę pochodzącej od chomika immunizowanego wektorem adenowirusowym obejmującym pełnej długości hTSHR (AdTSHR). Ta stymulująca TSHR-Ab rozpoznała konformacyjny epitop na antygenie TSHR i był silnym stymulatorem tarczycy wykrywalnym z zaledwie 20 ng / ml. Było to zgodne z oczekiwaniem, że przeciwciało stymulujące tarczycę powinno aktywnie stymulować na poziomie nanogramów, co określono przez inaktywację i wchłanianie TSHR-Ab w surowicy pacjenta Gravesa przy użyciu białka ektodomeny TSHR (13). Co ciekawe, wyższe stężenia MS-1 wykazały zmniejszoną aktywność, co wykazano przez zmniejszenie wytwarzania cAMP. Mechanizmy odpowiedzialne za tę redukcję siły pozostają jeszcze do ustalenia, ale prawdopodobnie wymagają albo regulacji w dół, albo rozwoju inaktywacji receptora związanego z multimeryzacją receptora, jak wcześniej sugerowaliśmy (1). Każde z przeciwciał monoklonalnych zbadanych w tych badaniach rozpoznało konformacyjny epitop na antygenie TSHR, jak wykazano przez niepowodzenie rozpoznawania antygenu po utrwaleniu. W celu dalszego zbadania tych epitopów zastosowano komórki CHO trwale eksprymujące warianty TSHR. Z tych badań było jasne, że MS-1 i TAb-8 rozpoznają epitop konformacyjny z udziałem TSHR. tylko podjednostki, podczas gdy TAb-4, TAb-6 i TAb-16 rozpoznawały epitopy konformacyjne obejmujące reszty TSHR 317. 366 (Tabela 2 i Figura 4) poddane cięciu TSHR (27). Byliśmy również w stanie zbadać wpływ MS-1 na sam podział TSHR. Wykazaliśmy, że TSH przyspiesza cięcie TSHR w sposób zależny od dawki, ale potem odkrył, że MS-1 nie naśladował działania TSH
[patrz też: lek do płukania zatok, ksobne, centrum rehabilitacji kraków ]

Tags: , ,

Comments are closed.

Powiązane tematy z artykułem: centrum rehabilitacji kraków ksobne lek do płukania zatok